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| 北京莱普特PCR扩增仪的使用 |
| 发布时间：2017-05-15 阅读：1360次 |
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导读：北京莱普特PCR扩增仪被广泛地运用在医学和生物学的实验室，例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊断、基因复制，以及亲子鉴定。知晓北京莱普特PCR扩增仪的使用原理才能好的操作它。
北京莱普特PCR扩增仪的工作原理
类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：
①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。到达平台期（Plateau）所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。
北京莱普特PCR扩增仪操作步骤
1. 在0.2mlEppendorf管内配制反应体系：
2. 打开电源开关
3. 选择new进入编程操作
4. 按下列程序进行编程： （1） 94℃预变性5min；（2） 94℃变性50sec； （2） 55℃退火50sec；（4） 72℃延伸10 sec；
5. （5）重复步骤②-④30次；（6） 72℃彻底延伸10min
6. 从file菜单中，调取程序；
7. 按回车键确认后，按照提示输入相应的配制反应体系体系；
8. 启动程序；
9. 程序结束后，取出Eppendorf管。
10. 电泳检测PCR结果。
北京莱普特PCR扩增仪保养
1．样品池的清洗先打开盖子，然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡样品池5min，然后清洗被污染的孔；用微量移液器吸取液体，用棉签吸干剩余液体；打开PCR仪，设定保持温度为50℃的PCR程序并使之运行，让残余液体挥发去除。一般5～10min即可。
2．热盖的清洗对于荧光定量PCR仪，当有荧光污染出现，而且这一污染并非来自样品池时，或当有污染或残迹物影响到热盖的松紧时，需要用压缩空气或纯水清洗垫盖底面，确保样品池的孔干净，无污物阻挡光路。
3．仪器外表面的清洗清洗仪器的外表面可以除去灰尘和油脂，但达不到消毒的效果。选择没有腐蚀性的清洗剂对PCR仪的外表面进行清洗。
4．换保险丝先将PCR仪关机，拔去插头，打开电源插口旁边的保险盒，换上备用的保险丝，观察是否恢复正常。
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