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非洲猪瘟抗原检测是否可以满足现有临床的所有需求?
发布时间:2019-11-13 阅读:486
    兽医协会主办的第八届兽医大会分别为猪病、禽病、牛羊病、实验室检测、中兽医、实验动物兽医、马兽医;设置课程近80余场,分别就疫病流行态势、疫病防控、疾病诊断、疫病净化、生物安全等方面进行了新技术展示与问题探讨。
    笔者跟踪了实验室检测专场报告,现将非洲猪瘟检测诊断技术研究与应用相关内容汇编如下,以供参考。
    兽用药品工程技术研究中心田克恭教授作了《非洲猪瘟诊断技术研究与应用》的专题报告。田克恭教授分别就当前非洲猪瘟的诊断要点、非洲猪瘟病毒荧光热对流PCR的研究与应用、非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测技术的研究及应用这三部分内容作了精彩论述。
    田克恭教授指出目前猪场可划分为三种情况:未发病猪场、可疑/发病猪场和已清场猪场。对于每种情况的猪场都有各自的任务与要求,就“拔牙”而言,准确、快速的诊断检测至关重要,决定着猪场是按照栏舍定点清除还是按照线/栋舍清除,甚至是全场清除。
    目前市场上关于非洲猪瘟病毒核酸检测的试剂盒非常多。田克恭教授简单分析了现有核酸诊断产品的特点,同时也指出了目前遇到的一些问题:实验室条件要求高、操作复杂、耗时长,易污染。
    关于如何实现核酸诊断的准、快、便、净,田克恭教授介绍了他们团队的技术成果——非洲猪瘟病毒荧光热对流PCR。
    笔者注:生物安全仍然是目前非洲猪瘟防控的手段,“拔牙”措施是目前发病猪场控制损失的有效途径。实验室检测为生物安全措施及“拔牙”方法提供了强有力的技术支撑。对非洲猪瘟病毒而言,实现核酸诊断的准、快、便、净,是每个公司、每个实验室的工作目标及方向。
    抗原检测在非洲猪瘟早期诊断及疫情确诊方面具有不可替代的作用,但是抗原检测是否可以满足现有临床的所有需求呢?对此,田克恭教授着重介绍了非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测技术的研究及应用。
    在本章节中,田克恭教授主要论述了以下几个方面:
    1、核心抗原的研究——ASFV相关蛋白的表达与纯化。
    2、抗体检测试剂盒的研发
    2.1  样品盘的建立:样品盘包括特异性样品盘与敏感性样品盘;
    2.2  抗原筛选与工艺研究:CV值小于10%
    2.3  特异性研究;
    2.4  敏感性研究:
    田克恭教授指出人工感染猪在感染后10-14天开始抗体转阳。
    3、ASFV ELISA抗体检测试剂盒的临床应用
    3.1  感染史追溯;
    3.2  抗体持续监测;
    3.3  引种筛查评估;
    3.4  病因综合分析。
    田克恭教授通过几个案例讲解了ASFV ELISA抗体试剂盒的应用。在个案例中我们可以清晰的看到非洲猪瘟病毒抗原阴性抗体阳性猪只的存在,这与笔者在临床实践中的观察结果一致。为确保复养不留遗憾,建议选择抗原抗体双阴猪只。第二个案例告诉我们非瘟疫情下各猪场仍然要关注其它传染病。
    在笔者的临床实践中发现,ASFV ELISA在“拔牙”过程中也发挥着重要作用,我们发现,在“拔牙”过程中有两种情况容易被忽略或遗漏,a、未表现明显症状或症状轻微被现场人员忽略的猪只;b、Ct值在37以上猪只,因合测而被遗漏。基于此,我们建议在“拔牙”之后2周左右,需要对周边猪群甚至全栋猪群进行抗体检测清除。
    金诺诊断基于非洲猪瘟病毒(ASFV)P30蛋白研制出了非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒,通过样品盘对试剂盒的敏感性及特异性进行了大量研究,并与知品牌进行了对比,从而确保ASFV ELISA抗体检测试剂盒能够准确的反映猪群状态,为各公司引种、“拔牙”、抗体监测等工作提供客观资料。现将该产品的验证结果汇报如下:
    1、稳定性好
    2、特异性高
    金诺诊断韩国研究院采用数百份未感染非洲猪瘟前采集的猪血清进行检测,没有检出阳性样本。
    3、与不同进口品牌比对情况
    根据不同需求,利用金诺诊断非洲猪瘟抗体检测试剂盒进行非瘟抗体检测,可以减少非洲猪瘟风险,减少疫情损失。
    1 引种  
    新场或复产场引种时,对后备猪只进行ASFV抗原和抗体检测,确保ASFV双阴猪只入场。
    2 “拔牙”
 “拔牙”过程中,对本栋舍猪群或感染猪只临近猪群进行ASFV抗体监测,确保感染猪只完全淘汰。
    3 日常监测
    定期对猪群进行ASFV抗体监测,评估猪场ASFV感染情况及时清除抗体阳性猪只。 







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